摘要
目的 探究环泊酚调控应激诱导蛋白 2( SESN2) 表达量及其在氧糖剥夺/复糖复氧( OGD/R) 诱导的 HK-2细胞铁死亡中的作用 方法 选择野生型及 SESN2 基因敲低的人肾皮质近曲小管上皮细胞( HK-2 细胞株) ,将所选细胞分为五组: 正常培养组( C 组) 、 OGD/R 组( O 组) 、OGD/R+环泊酚 50 μmol/L 组( OC 组) SESN2 基因敲低+OGD/R 组( SO 组) 和 SESN2 敲低+OGD/R+环泊酚 5 0 ~ μ m o l / L 组( SOC 组) 其中 O 组、OC 组、SO 组和 SOC 组建立 OGD/R 细胞损伤模型。 采用CCK-8法检测细胞存活率,荧光酶标仪检测 ROS 荧光强度。 收集细胞,采用微板法检测丙二醛( MDA) 含量,采用比色法检测谷胱甘肽( GSH) 半胱氨酸 ( C y s ) 含量; 收集细胞培养上清液,采用ELISA 法检测白细胞介素-6( IL-6) 肿瘤坏死因子-α( TNF-α) 乳酸脱氢酶( LDH) 浓度 提取细胞蛋白和细胞 RNA,分别采用 Western blot 和 q R T - P C R 法检测 SESN2、 GPX4、 FSP1 蛋白含量和 mRNA 表达量。 结果 与 C 组比较,O 组、 OC 组、 SO 组和 SOC 组细胞存活率、 GSH、 Cys 含量、 GPX4、 FSP1 蛋白含量和 mRNA 表达量明显降低( P<0. 05) ,ROS 水平 MDA 含量 细胞培养上清液 IL-6 TNF-αLDH 浓度 SESN2 蛋白含量和 mRNA 表达量明显升高( P < 0 . 0 5 ) 与 O 组比较,OC 组细胞存活率GSH Cys 含量 SESN2 GPX4 FSP1 蛋白含量和 mRNA 表达量明显升高( P < 0 . 0 5 ) ,ROS 水平 MDA含量 细胞培养上清液 I L - 6 . T N F - . L D H 浓度明显降低( P < 0 . 0 5 ) ;SO 组细胞存活率 G S H , C y s 含量SESN2 GPX4 FSP1 蛋白含量和 m R N A 表达量明显降低( P < 0 . 0 5 ) ,ROS 水平 MDA 含量 细胞培养上清液 IL-6、TNF-α 、LDH 浓度明显升高( P < 0 . 0 5 ) 与 OC 组比较,SOC 组细胞存活率、 GSH、 Cys 含量 SESN2 GPX4 FSP1 蛋白含量和 mRNA 表达量明显降低( P < 0 . 0 5 ) ,ROS 水平 MDA 含量 细胞培养上清液 IL-6 TNF- LDH 浓度明显升高( P < 0 . 0 5 ) 与SO 组比较,SOC 组细胞存活率 G S H , C y s 含量、SESN2、GPX4、FSP1 蛋白含量和 mRNA 表达量明显升高( P < 0 . 0 5 ) ,ROS 水平、MDA 含量、细胞培养上清液 IL-6 TNF-α LDH 浓度明显降低( P < 0 . 0 5 ) 结论 环泊酚可以减轻 HK-2 细胞 OGD/R 损伤,降低铁死亡水平和细胞氧化应激反应,可能与上调 SESN2 表达量有关。